اساتید راهنما

دکتر محسن قدمی

دکتر مجید کابلی 

استاد مشاور: دکتر مرضیه آقاحسینی

نگارنده: خدیجه بنیادی

مقطع: کارشناسی ارشد ژنتیک انسانی

عنوان پژوهش: بررسی ارتباط پلی مورفسیم های ناحیه پروموتر ژنFSHR  وعدم موفقیت درIVF

چكيده

مقدمه: ناباروری یکی از دغدغه های مهم زوج های جوان می باشد و شیوع بالایی در دنیا دارد به طوریکه نرخ ناباروری در دنیا 12 درصد تا 15 درصد گزارش شده است و میزان متوسط ناباروری در کشور ما 2/20 درصد تخمین زده می شود. ناباروری دلایل متعدد ژنتیکی و محیطی دارد و بررسی دقیق علت ناباروری در زوجین به دست یابی راههای موثر درمانی در برخی موارد منجر گردیده است. یکی از راههای درمانی که حدود 80 میلیون زوج در دنیا به آن روی آورده اند،  IVF (In Vitro Fertilization می باشد (لقاح  تخمک و اسپرم در محیط آزمایشگاه و سپس انتقال تخمک بارور شده به رحم مادر). این روش پیچیدگی و هزینه بالایی دارد و عدم موفقیت در آن بار روانی و مالی فراوانی به زوجین تحمیل می کند. از این رو پرداختن به عوامل عدم موفقیت در این روش و راههای درمانی آن امری مهم می باشد. یکی از مواردی که در رابطه با ناباروری و IVF ناموفق کمتر مورد توجه قرار گرفته˓ گیرنده ژن FSH می باشد. از آنجایی که هورمونFSH  در تحریک تخمدان برای تخمک گذاری و تنظیم هورمون استرادیول و حفظ جنین در طی بارداری نقش مهمی دارد˓گاه مشاهده گردیده با وجود تجویز بالای این هورمون فرد با عدم موفقیت درIVF مواجه است. در این مورد بررسی ژن گیرندهFSH  مورد توجه قرار می گیرد چرا که بین جهش ها و پلی مورفیسم های این ژن و افزایش هورمونFSH  که به ناباروری منجر گردیده است در جمعیت های مختف ارتباط معنی داری مشاهده گردیده است. از جمله مهم ترین پلی مورفیسم های این ژن، پلی مورفیسم هایThr307Ala و Asn680Ser در اگزون 10 ژن گیرنده FSH می باشد. اخیرا محققین به بررسی پلی مورفیسم های ناحیه پروموتر پرداخته اند وپلی مورفیسم هایی در نواحی 29- و37- و114- و123- و138- مشاهده کردند که با افزایش هورمونFSH  و پاسخ دهی متفاوت تخمدان به دوز خارجی هورمونFSH  طی IVF همراه بوده است. در ایران تا کنون مطالعه ای در مورد ناحیه پروموتر ژن گیرنده FSH انجام نشده است. هدف:با توجه به تفاوتی که در پاسخ به هورمون FSH در بین زنان در جوامع مختلف وجود دارد، بررسی پلی مورفیسم های این ناحیه در بین زنان ایرانی ضروری می باشد. این مطالعه به بررسی پلی مورفیسم های ناحیه پروموتر ژن گیرندهFSH  و ارتباط آن با ناباروری وIVF  ناموفق پرداخته است که تا کنون در ایران بررسی نشده است.روش کار: پلی مورفیسم های ناحیه پروموتر ژن FSHR در30 خانم با بارداری طبیعی و 30 خانم نابارور باIVF  موفق و 30 خانم نابارور با  IVFناموفق، با تکنیکPCR  و Sequensing مورد ارزیابی قرارگرفت .بحث و نتیجه گیری:درگروه مورد مطالعه در ناحیه 29- پروموتر از نظر ژنوتیپی تفاوت داشتند˓ که پس از بررسی های آماری تفاوت معنی داری بین پلی مورفیسم این ناحیه در بین زنان مورد مطالعه مشاهده نشدP=0.27)).  بررسی بالینی نشان داد مقدار کل گنادوتروپین تزریق شده درخانم های نابارور با ژنوتیپ A/A29- که IVF موفق داشته اند بیشتر از زنان نابارور باIVF  موفق و ژنوتیپG/G  29- بوده است.  .(p=0.001)این مطالعه نشان داد پاسخ تخمدان به هورمون FSH در ژنوتیپ -29A/A در ژن FSHR ضعیف تر از ژنوتیپ-29G/G  است.

کلمات کلیدی:IVF . پروموتر ژن FSHR ، ناباروری

 

Abstract

Association of FSH receptor promoter’s polymorphisms with IVF failure

Background: Infertility is one of the important concerns of young couples, and has high frequency in the word (12-15%). In Iran, the average rate of infertility is estimated to be 20.2 percent. Both genetic and environmental factors involved in infertility. Study of the exact causes of infertility in couples leads to achieve effective way of treatment procedures. IVF (In Vitro Fertility) is one of the costly procedures for about 80 million infertile couples. IVF is a type of assisted reproductive technology (ART) which includes fertilizing an egg with sperm in a laboratory dish and transferring fertilized egg to the uterus. IVF-failure causes a significant emotional and financial burden on the infertile couples. Therefore, in this procedure dealing with the causes of IVF-failure and treatment is very important. Follicle Stimulating Hormone Receptor (FSHR) gene is one of the factors in association with infertility and IVF-failure. Follicle Stimulating Hormone (FSH) has an important role in stimulating the ovary for ovulation, regulating estradiol hormone and in maintaining the pregnancy. However, sometimes infertility and IVF-failure have been observed in people with high doses of FSH hormone. In this case, study of the FSH receptor gene has to be considered, due to seeing correlation between mutations and polymorphisms of FSHR gene and the increased FSH hormone which lead to infertility in various populations.  The Thr307Ala and Asn680Ser polymorphisms within exon 10 of the FSHR gene are the common polymorphisms in association with infertility. Recently, researchers have studied promoter polymorphisms (positions - 29 ˓-37 ˓ - 114 ˓ -123 and - 138). Objective: within the FSHR gene and have been reported the association between increase of FSH and ovarian response to different doses of FSH in IVF in different populations.  To best of our knowledge, in Iran, no study has been done on the FSH receptor gene promoter region. Due to differences in respond to FSH hormone in various countries, studying polymorphisms in this region among Iranian women is necessary. Materials and Methods: This study examined the FSH receptor promoter's polymorphisms and their association with infertility and IVF-failure. For this purpose, 30 women with normal pregnancy, 30 infertile women with unsuccessful IVF and 30 infertile women with successful IVF were collected and the promoter region of FSHR gene was assessed in them by PCR sequencing. Results: The results demonstrated no significant difference in allelic variants frequency and genotype distribution between each category of subjects when analyzing the FSHR SNPs in the core promoter region (p-value >0.05). However analysis of the data revealed that the subjects with A/A genotype compared with G/G genotype subject at the –29 position received the highest amount of exogenous FSH for ovulation induction(p=0.001). Conclusion: These results indicate that SNP of the core promoter region at position. –29 FSHR gene may influence sensitivity of the FSHR to FSH in vivo, It may be concluded that the AA genotype at position. –29 associated with the poor ovarian response, so that; subjects with AA genotype at the –29 position required the highest amount of exogenous FSH for ovulation induction during IVF process.

 Keyword: IVF (In Vitro Fertility), FSHR gene, promoter, Infertility, IVF-Failure