بررسی میزان بیان ژن های FOXP3 و RORγt و میزانIL-10 در سوپ رویی کشت سلول های تک هسته ای (PBMC) در خ
استاد راهنما
دکتر نیما رضایی
اساتید مشاور
دکتر علی امبر امیرزرگر
دکتر محمد جعفر محمودی
نگارش : فاطمه گرزین
مقطع کارشناسی ارشد رشته ایمنی شناسی پزشکی
عنوان پایان نامه بررسی میزان بیان ژن های FOXP3 و RORγtو میزانIL-10در سوپ رویی کشت سلول های تک هسته ای (PBMC) در خون بیماران مبتلا به نارسایی قلبی مزمن(CHF)
مقدمه:نارسایی مزمن قلبی یکی ازسندرمهای پیچیده بالینی است که در مرحله نهایی بیماریهای قلبی مختلف خودرا نشان می دهد. این نارساییعامل عمده مرگ ومیر درسراسر جهان است. سيستمهاي فيزيولوژيك متعددي در پاتوژنز نارسايي قلبي به عنوان يك اختلال مولتي سيستمپيچيده نقش دارند. فعال شدن سيستم ايمني و التهاب مزمن يكي از مكانيسمهاي پاتوژنيك مهمي است كه در سالهاي اخير مورد توجه قرار گرفته است. با توجه به فعال شدن نامتوازن سیستم ایمنی و نقش غیرقابل انکار آن در پاتوژنز نارسایی قلبی مزمن، شناسایی مهمترین فاکتور(های) موثر در پیشبرد و یا تنظیم پاسخهای التهابی به طراحی روشهای درمانی نوینی، که به صورت کاملاً انتخابی و اختصاصی آبشارهای التهابی را مهار میکند، کمک بسزایی مینماید.
هدف از این مطالعه بررسی تغییرات دینامیک بیان ژنهایFOXP3،RORγtوIL-10 و نیز بررسی میزان IL-10 در سوپ رویی کشت سلولهای تک هسته ای( PBMCs) بیماران CHF با افراد کنترل سالم میباشد.
روش اجرا: در این مطالعه بیماران مبتلا بهCHF شامل 42 بیمار با زمینه ایسکمیک(71.4%) و غیر ایسکمیک (28.5%) و42 فرد سالم بعنوان کنترل مورد بررسی قرار گرفتند. استخراج RNA و سنتز cDNA از تمام نمونهها صورت گرفت و بیان mRNA برای ژنهای FOXP3، RORγtو IL-10 انجام گرفت.میزان IL-10 نیز در سوپ رویی PBMCs با تکنیک الایزا اندازهگیری شد.
نتیجه گیری: اندازهگیری میزان بیان ژن FOXP3، RORγtو IL-10 در خون بیماران CHF وهمچنین بررسی بیان پروتئین در سوپ رویی PBMCs بیماران CHF با افراد کنترل سالم تفاوت معناداری ندارد.
واژههاي كليدي:CHF،FOXP3، RORγt،PBMCs
Introduction: Chronic heart failure is a complex clinical syndrom in the final stage of heart disease which is the major cause of worldwide mortality. Several physiological systems are involved in the pathogenesis of the disease. Activation of immune system and chronic inflammation is one of the most important pathogenic mechanisms that are taken into consideration in recent years. Due to the unbalanced function of immune system and its undeniable role in the pathogenesis of chronic heart failure, identifing the factors contributing to the inflammatory responses could be the beneficial way to design new therapeutic methods, which are quite selective and specific.
The aim of this study is to evaluate the expression of genes including FOXP3, RORγt, IL-10 and measurement of IL-10 in the culture supernant mononuclear cells (PBMCs) in CHF patients comparing with healthy control subjects respectively.
Patients and Methods: In this study, patients with CHF, including 42 patients (71.4% ischemic and 28.5% non-ischemic) and 42 healthy controls were studied. RNA extraction and cDNA synthesis was performed on all samples and mRNA expression for genes FOXP3, RORγt, IL-10 was also evaluated. The amount of IL-10 protein in supernant of PBMCs was measured by ELISA technique.
Conclusion: The FOXP3, RORγt and IL-10 protein expression in the blood of patients with CHF, as well as supernant PBMCs in CHF patients with healthy control subjects had no significant difference.
Keywords: CHF, FOXP3, RORγt, PBMCs
این وبلاگ